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(1) [外斐试验]【实操】如何做好肥达、外斐试验
作者：赵晴 昆明市东川区人民医院检验科
来源：检验地带网
肥达反应（Widal test）：
用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，检测受检血清中有无相应抗体的半定量凝集试验，称肥达反应(Widal test)。本试验与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下，能辅助诊断伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起的肠热症。
外斐反应(Wiel-Felix):
斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原(OXk、OX19 、OX2抗原)具有共同的耐热性多糖类属抗原，常用后者代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，这种交叉凝集试验称为外斐反应，用于立克次体病的辅助诊断。
传统的肥达、外斐试验采用试管法，存在试剂用量大、结果不易观察等缺点，现介绍一种较实用的平板法，试剂用量仅为试管法1/2、结果易判定等优点。
1试验的第一步（准备）：
准备一块U型反应板，长18厘米，宽9厘米，每孔容积1毫升，并在上面做出清晰标识。
2试验第二步（加样）：
操作步骤
3试验第三步：混匀
用平板混合器以不会导致微量反应板内容物溅出的强度（100转/分）混合3分钟。
4试验第四步：恒温
放37℃度水浴箱恒温24小时，放水浴箱时请用纸板或其它物品做必要遮挡，此步不可省略，否则，请看下图：
这是遮盖纸板收集到的水滴。若这些水滴至反应板内，看结果时就真是葫芦僧乱判葫芦案了。做任何试验，细节真的很重要。
5结果判定
肥达反应临床意义：
1 一般O>1:80,H>1:160,甲、乙、丙>1:80才有临床意义，或在疾病早期及中后期分别采集两次血清，若第二份血清比第一份的效价高4倍以上增高具有诊断价值。
2 O及甲、乙其中之一项或丙凝集效价增高时，可以诊断副伤寒甲、乙、丙的某一种。
3 O抗原产生的抗体为lgM, 出现较早，存在于血清的时间较短，与相应的抗血清反应时呈颗粒状凝集;H抗体为lgG, 出现较迟，持续存在的时间较长，与相应的抗血清呈絮状反应。
4 O高H不高：
a .疾病早期；
b.沙门菌属中其它菌种感染引起的交叉反应；
c.H→O变异的沙门菌引起的感染。
建议一周后复查，如一周后H也有升高，可证实为肠热症。
5 H高O不高：
a .可能为疾病的晚期；
b.以往患过伤寒、副伤寒或接受过预防接种；
c.回忆反应等。
外斐反应临床意义：
1 血清抗体效价达1：160以上有意义。病程中双份或多份血清试验，若效价有4倍以上增高具有诊断意义。
2 往往有些病例在整个疾病过程中效价不见上升，如复发型斑疹伤寒及约15%的经疫苗接种后感染斑疹伤寒的病例。
3 有些轻症斑疹伤寒或某些发病严重者，其它血清学试验阳性，但其外斐反应可阴性。
4 恙虫病立克次体和变形杆OXk株有共同的抗原成分，恙虫病患者血清与OXk抗原发生凝集而不与OX19、OX2 发生凝集。
5 假阳性反应还发生在变形杆菌尿路感染、伤寒、钩端螺旋体病，回归热、疟疾及各种病因引起的严重肝病的病人血清检查，孕妇也往往呈假阳性反应。因此，对外斐反应结果应结合临床慎重分析和判断。
实例分析：
此板肥达、外斐试验结果为阴性。如果足够细心的话，可以看到OXk第二排（血清最终稀释倍数1：40）出现了异常，是因为变形杆菌抗原很不稳定，特别是经保存以后往往会使血清效价增高，尤以OXk抗原为甚。因而一般不宜作长久保存，并应与阳性病人血清校正其凝集性。
此板O抗原第二排（血清最终稀释倍数1：40）出现了凝集，
此板O抗原与相应的抗血清（血清最终稀释倍数1：320）呈现了颗粒状凝集;H抗原与相应的抗血清（血清最终稀释倍数1：320）呈现了絮状凝集。
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(2) [外斐试验]【微生物学检验】知识点整理（第二部分）
室内质量控制的内容包括哪些？
答：室内质量控制的内容包括：⑴人员与组织管理 ⑵操作手册 ⑶培养基的质量控制 ⑷试剂、抗血清和染色液的质量控制 ⑸抗生素与抗生素纸片 ⑹仪器 ⑺标本检验过程的质量控制 ⑻室内全面质量控制 ⑼标准菌株的来源和保存。
对于不同种类的培养基，应如何进行无菌试验？
⑴对分装后灭菌的培养基：随机5%～10%的量，35℃，培养24h；⑵无菌操作分装的培养基对全部培养基35℃，培养24h；⑶选择培养基部分加入10～20倍无抑制性肉汤35℃，培养24h；以上情况证明无菌生长为合格。
K-B法质控结果出现错误，试分析其原因？
⑴质控结果记录错误 ⑵量取抑菌环直径时读数错误 ⑶标准菌株被污染或其他改变 ⑷接种的菌悬液太浓或过淡 ⑸ 0.5管麦氏浊度标准管未摇匀或已过期失效 ⑹孵育温度或气体环境不正确 ⑺MH培养基质量有无问题 ⑻含药纸片失效。
细菌耐药机制？
主要有四种①产生一种或多种水解酶钝化酶和修饰酶。②抗生素作用的靶位改变，包括青霉素结合蛋白位点和DNA解旋酶的改变。③细菌膜的通透性下降，包括细菌生物被膜的形成和通道蛋白丢失。④细菌主动外排系统的过度表达。
超广谱β内酰胺酶检测
分为纸片检测和液体稀释法检测，检测对象为肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌，大肠埃希菌和奇异变形杆菌。结果判读：肺炎克雷伯菌，头孢泊肟抑菌环直径≦17mm;头孢他啶抑菌环直径≦22mm;氨曲南抑菌环直径≦27mm;头孢噻肟抑菌环直径≦27mm;头孢曲松抑菌环直径≦25mm.
K-B法（纸片扩散法）检测原理及影响因素？
原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
影响纸片法药敏试验结果的因素有:1培养基的质量,如pH、深度、硬度和表面湿度等。对每批商品化或自配MH琼脂必须用标准质控菌株进行检测,合格后方能使用;2药敏纸片的质量,含药量和保存方式;3接种菌量正确与否是影响结果的重要因素之一,取决于麦氏比浊标准的配制,正确使用和保存;4试验操作质量;5孵育条件,温度和时间;6抑菌圈测量工具的精度;7质控标准菌株本身的药敏特性是否合格,有无变异。
伤寒患者标本采集。
根据疾病的类型，病情和病程的不同分别采集不同的标本。伤寒沙门菌分离培养原则上于发病第一周取血，第二三周取粪便做培养的分离率高，第三周也可取尿液培养，全病程均可做骨髓培养。
细菌生长繁殖的方式和条件？
.答：方式：无性二分裂法条件：①营养物质②温度③酸碱度④气体
简述金黄色葡萄球菌的鉴定依据。
答：1形态染色：革兰阳性球菌，葡萄串状排列2菌落特征：在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环 3鉴定试验：凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳
简述革兰染色的意义
答.①用于鉴定细菌②有利于临床药物的选择③与致病性有关
写出革兰染色所用染液及染色操作方法。
答：革兰染色染液：结晶紫染液、卢戈碘液、 95 ％乙醇、稀释石炭酸复红
染色步骤：初染 1 分钟，水洗―媒染 1 分钟，水洗―脱色 30 秒至 1 分钟―复染 1 分钟
简述影响革兰染色的因素有哪些
答：①操作因素 涂片的厚薄、脱色时间的长短；
②染液因素染液的蒸发、结晶紫染液防止过久出现沉淀；③细菌因素 菌龄
简述大肠埃希菌的主要鉴定依据
.答.①分解葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘露醇 产酸产气②IMViC: ++--③KIA:++-
④触媒试验阳性 硝酸盐还原试验阳性 氧化酶试验阴性
乙肝病毒“二对半”检测的内容是什么和意义？
答： ①HbsAg （1分） ②抗 HBs （1分） ③HBeAg （1分）
④抗 HBe（1分） ⑤抗 HBc（1分）3答：（ 1 ）乙肝病毒“二对半”检
（ 2 ）其临床意义是： HBsAg ：是 HBV 感染的标志 抗 HBs ：是机体对 HBV 产生免疫力的标志 抗 HBc ：抗 HBcIgM 是 HBV 在体内复制的指标 HBeAg ：表明 HBV 复制，血清具有高度传染性 抗 HBe ：表明 HBV 复制减少，传染性减弱，病情趋于好转
简述病毒的基本特征？
答：1形体极其微小，一般都能通过细菌滤器，故必须在电子显微镜下才能观察：2没有细胞构造，3每一种病毒只含一种核酸，不是DNA就是RNA；
肠杆菌科有哪些共同特点
答：革兰阴性杆菌 2.营养要求条件不高在普通培养基上生长良好，37度生长3.生化反应活泼， 4.抗原性，有菌体抗原、表面抗原、鞭毛抗原，5.变异性，易发上H-O变异R-S变异等。6.致病性 均以菌毛粘附肠粘膜上皮，内毒素、肠毒素为主要致病物质。
列举哪些病原体可以引起性传播疾病 （6种以上）
答：①沙眼衣原体②溶脲脲原体③淋病奈瑟菌④HIV⑤人型支原体⑥生殖支原体
简述外斐反应的原理及意义。
答：此项试验是一项非特异性凝集反应。因某些立克次体与变形杆菌某些OX菌株有共同抗原成分，故用变形杆菌OX19、2、K株抗原代替立克次体抗原，检查患者血清中立克次体抗体的水平和变化。如抗体效价≥1：160或双份血清效价增长≥4倍，为阳性反应。流行性和地方性斑疹伤寒、恙虫病患者可出现阳性反应。由于该试验为非特异性，故必须结合流行病学和临床症状才能作出确诊。
内毒素和外毒素的特点有何不同？
答：区别要点 外毒素 内毒素
1.来源 革兰阳性菌和部分革兰阴性菌 革兰阴性菌
2存在部位 由细菌合成并分泌到菌体外，细胞壁成分，菌体裂解后释出少
数菌裂解后释出
3化学成分 蛋白质 脂多糖
4.稳定性 不稳定，不耐热 稳定，耐热
5.毒性作用 ： 外毒素极强，对组织器官有选择性的毒害作用，引起特殊临床表现。 内毒素较弱，各菌的毒性作用大致相同。
6.抗原性： 外毒素强，刺激机体产生抗毒素，中和游离外毒素的毒性作用，0.4﹪甲醛处理，可脱毒成失去毒性而保持抗原性的类毒素。内毒素弱，刺激机体产生的抗菌抗体无明显中和作用，甲醛处理不形成类毒素。
写出脓汁标本金黄色葡萄球菌的检验程序和鉴定依据
脓标本--【1、直接涂片染色2、分离培养(血平板)--鉴定试验和药敏试验 --（涂片染色、耐热核酸酶、 血浆凝固酶、其它试验 、药敏试验 ）--报告】
金黄色葡萄球菌鉴定依据：（ 1 ）形态染色：革兰阳性球菌，葡萄串状排列（1分） 2 ）菌落特征：在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环 （2分）3 ）鉴定试验：凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳（2分）
革兰阳性菌和阴性菌的细胞壁有何区别
答：（1）革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、五肽桥、四肽侧链组成而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖由聚糖骨架、四肽侧链组成。2）革蓝阳性菌细胞壁的肽聚糖较厚而革蓝阴性菌细胞壁的肽聚糖较薄。3）革蓝阳性菌细胞壁有磷壁酸而革蓝阴性菌细胞壁没有。4）革蓝阳性菌细胞壁坚韧度强而革蓝阴性菌细胞壁坚韧度弱。5）革蓝阳性菌细胞壁无外膜而革蓝阴性菌细胞壁有外膜
怎样报告结核菌检查时抗酸染色镜检和斜面接种的结果？
答：抗酸：- 仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌± 300个视野内发现1~2条抗酸菌＋ 100个视野内发现1~9条抗酸菌2＋ 10个视野内发现1~9条抗酸菌3＋ 每个视野内发现1~9条抗酸菌4＋ 每个视野内发现9条以上抗酸菌
斜面：＋ 斜面20个菌落以上，占斜面1/4以下、2＋ 斜面上菌落生长面积占1/4以上，1/2以下、3＋ 斜面上菌落面积占斜面1/2以上，3/4以下、
4＋ 斜面上菌落生长密集，成菌苔
怎样鉴定粪便标本中的福氏志贺菌？（写出检验程序，鉴定依据
答：程序：标本-增菌、分离培养-初步鉴定-最终鉴定-血清学诊断
白色念珠菌鉴定的依据有哪些
答：①直接镜检观察到圆形或卵圆形的芽生孢子、假菌丝，假菌丝中隔部伴有芽生孢子，顶端有厚壁的厚膜孢子，革兰染色阳性，着色不均匀。②玉米琼脂室温及35℃均生长并形成顶端厚膜孢子，42℃也能生长。③芽管形成试验阳性。④葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖发酵试验阳性，蔗糖、乳糖发酵试验阴性。⑤葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、蕈糖同化试验阳性，乳糖同化试验阴性。⑥三氮唑氯试验，培养基不变色或淡红色。
S-R变异：自临床标本初次分离的菌株一般都是光滑型，经人工培养，传代后逐渐变成粗糙型菌落，此时菌体表面的特异多糖抗原丧失，在生理盐水中出现自凝。
H-O变异：是指有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。
位相变异：具有双相H抗原的沙门菌变成只有其中某一相H抗原的单相菌，称位相变异。
V-W变异：是指沙门菌失去Vi抗原的变异。
微生物:是存在于自然界中的一群形体微小结构简单肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜方达数百至数万倍才能观察到的微小生物
微生物学：是生物学的一个分支，是研究微生物的类型分布、形态结构、生命活动及其规律、遗传进化，以及与人类、动物植物等相互关系的一门学科。
医学微生物学：主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病，以保证和提高人类的健康水平。
临床微生物学又称诊断微生物学是研究病原微生物检查以及微生物与宿主相互作用的一门医学专业和应用学科。
细菌属于原核生物界，是一种单细胞微生物，形体微小，结构简单，有细胞壁和原始核质，无核膜和核仁，除核糖体外无其他细胞器。
肽聚糖:又称胞壁质，为细菌细胞壁所特有，主要是由包含两种糖衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成，几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五肽交联桥。
7 脂多糖(LPS)：为细菌所特有，主要是由包含两种衍生物的聚糖骨架和几种不同的氨基酸组成，几种不同的氨基酸可以组成四肽侧链和五胎交联桥。
8 质粒：使细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的闭合环状dna分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。
9 异染颗粒：有些细菌的内含体主要成分是多聚磷酸盐，主要用于磷的贮存，在细菌合成细胞组分时提供磷酸盐，同时在细菌代谢时作为能量来源。这些颗粒用蓝色染料甲基兰或甲苯胺蓝染色时可被染成不同深浅的蓝色，与菌体其他部分不同，显示异染效应，称为异染颗粒。
10 革兰染色：是细菌学最经典最常用的染色方法，
11 芽胞：很多革兰阳性细菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的圆形或卵圆形的小体，称为内生孢子，简称芽孢。
12．荚膜：有些细菌的细胞壁外包裹着一层排列有序且不易被洗脱的物质，称为荚膜。
13芽孢：很多革兰阳性细菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层荚膜包裹的的圆形的或卵圆形的小体称为内生孢子简称芽孢。
14热原质：或称致热源，是细菌合成的注入人体活动物体内能引起发热反应的物质。
7．氧化酶试验：氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌，首先使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C使对苯二铵氧化，生成有色的醌类化合物。
15．触酶试验：具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和新生态氧，继而形成分子氧出现气泡。
16．细菌的L型：细菌在体内或体外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接或间接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。
17消毒：是去除或杀灭大多数微生物的过程。
18灭菌：是通过物理或化学方法杀灭或去除所有微生物的过程。
19无菌：指物体不含活菌。
20高压蒸汽灭菌法：湿热灭菌，将物品暴露于饱和蒸汽121℃30min或高压蒸汽灭菌134℃13min。
21干热灭菌：将物品暴露于160℃120min或170℃60min，有空腔的物品，干热灭菌效果不如湿热。
22防腐：防止抑制细菌生长繁殖的方法，用于防腐的化学药物叫做防腐剂。
23无菌技术：防治微生物进入机体或其他物品的操作技术。
24医院感染：是指医院病人在医院内获得了感染，包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染，但不包括入院前已经开始或入院时已处于潜伏期的感染。
25质量保证：是有计划系统的评估和监测患者诊疗质量的整个过程，以便及时发现问题，采取有效措施，提高质量和服务。
26. 外毒素：是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖的过程中释放到菌体外的蛋白质。
27. 内毒素 革兰阴性菌的脂多糖，当菌体死亡崩解后游离出来。
28色素：某些细菌能产生不同颜色的色素，有助于鉴别细菌。
29抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。
30细菌素：某些细菌产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。
31敏感：S是指所分离得菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制。
32耐药R：是指所分离菌株不被测试药物常规剂量可达到的药物浓度所抑制，和（或）证明分离菌株可能存在某些特定的耐药机制，或治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。
33中介I：是指抗菌药物在生理浓集的部位具有临床效果，还代表敏感与耐药之间的缓冲区，以避免微小的、不能控制的技术因素造成重大的结果解释错误。
34种：使细菌分类的基本单元，将生物学性状基本相同的细菌群体归成一个菌种。
35．型：常指亚种以下的细分，当同种或同亚种不同菌株之间的性状差异不是以分为新的亚种时，可以细分为不同型。
36．菌株：从自然界分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株。
37培养物：指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。
38凝固酶试验：葡萄球菌可以产生两种凝固酶，一种结合酶，结合在细胞壁上，使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌的表面，发生凝集，可用拨片法测出，另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶，作用类似凝血酶原物质，可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质，而使纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而使血浆凝固，可用试管法测出。
42肥达反应：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的OH抗原，检测受检者血清中有无相应的抗体的半定量凝集实验。
43迁徙生长现象普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成波纹状薄膜布满整个培养基表面，是变形杆菌的特征。
44外斐反应:大部分立克次体与变形杆菌某些X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗性，临床上用变形杆菌代替立克次体与患者血清做凝集反应可作为立克次体病的辅助诊断试验称为外斐反应。
45不发酵格兰阴性杆菌，是指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需养或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性杆菌，多为条件致病菌。
46卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，可以见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小，这种现象称为卫星现象。
47嗜盐菌：钠离子能刺激其生长，有些菌种在无盐条件下不能生长。
霍乱红试验
48神奈川现象：从腹异染颗粒：用Neisser或Albert等染色法染色，细胞中的有些颗粒与细胞的颜色不同称为异染颗粒。
49锡克试验：是用于调查人群对白喉杆菌是否有免疫力的皮肤试验，其原理为毒素抗毒素中和反应。
50炭疽：炭疽芽孢杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌，俗称炭疽杆菌，试炭疽病的病原菌，炭疽是人畜共患的急性传染病，
51串珠实验：将待检菌接种于含青霉素0.05——0.5U/ml的培养基上，经37℃培养六个小时后炭疽杆菌可发生形态变化，显微镜下见大而均匀的圆球状菌体，呈串珠样排列。
52抗酸杆菌：一类略长带弯曲，有时呈分支状的杆菌，分枝杆状均属的细菌大多数有抗酸性，又称为抗酸杆菌。
53齐尼染色：是常用的抗酸染色法，染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色。
54卡介苗：是有毒力的牛型结核分枝杆菌在甘油胆汁和马铃薯的培养基中经13年230次传代而获得的减毒变异株。现已广泛用于人类结核病的防治。
55多重耐药结核病（MDRTP）：是指对两种或两种以上的抗结核药产生耐药性的结核菌感染。
56硫磺样颗粒：在浓汁标本中可以见到分枝缠绕的小菌落，即硫磺样颗粒。
57蛛网菌落：布氏放线菌的菌落直径为0.03到0.06mm，显微镜观察可见菌落由长度不等的蛛网状菌丝所构成，称为蛛网状菌落。
58厌氧菌：是指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。
59汹涌发酵：在牛乳培养基中能分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时产生大量气体（H2与CO2），将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，并将液面上的凡士林层向上推挤，甚至冲开管口棉塞，气势凶猛，称为汹涌发酵
60Nagler反应：在蛋黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈，是由于产气荚膜梭菌产生的卵磷脂酶分解蛋黄中的卵磷脂，可被特意的抗血清所中和，这一现象成。
61螺旋体：是一类细长柔软弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞性微生物，生物学上的地位介于细菌与原虫之间。
62支原体：是一类缺乏细胞壁，形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，再无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物，由于他们能形成有分支的长丝故称之为支原体。
63肺炎支原体：MP 是引起呼吸道感染的一种病原体，所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主，又称之为原发性非典型肺炎。
64冷凝集实验：支原体感染后机体产生的一类IgM自身抗体。是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性实验。
65衣原体：是一类专性包内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。
66立克次体：是一类微小的杆状或球状、革兰染色阴性、除极少数外均专性寄生在宿主细胞内的微生物。
67外斐反应:大部分立克次体与变形杆菌某些X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗性，故可用这些X菌株代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应去检测抗体，这种交叉凝集实验被称为外斐反应，可供立克次体病的辅助诊断。
68真菌：自成一界，为真核细胞型微生物，与原核细胞型微生物有许多共同点。具有典型的细胞核，不含叶绿素，以腐生或寄生方式摄取营养，细胞壁含几个质和纤维素，有完善的细胞器，能进行有性生殖和（或）无性生殖。
69二相型真菌：有些细菌可因环境条件（如营养温度和氧气等）改变，可由一种形态转变为另一种形态，此真菌称为二相型真菌。
70芽管形成实验：将假丝酵母菌接种于0.2~0.5ml人或动物血清中，37℃孵育1.5~4小时，镜检观察有无芽管的形成，此实验是白假丝酵母菌的鉴定试验。
71病毒：无细胞结构的最小、最简单的微生物。体积小、结构简单，只含有一种核酸，专性细胞内寄生的非细胞结构微生物。
72病毒体：完整的成熟病毒颗粒，由核酸和蛋白质组成，其核心只有一种核酸，外被蛋白质衣壳构成核衣壳，有些病毒的核衣壳外还备有包膜。
73病毒核心：是病毒的中心结构，其内充满DNA或RNA一种核酸，构成病毒的基因组。
74病毒衣壳：是包被在病毒核酸外的一层蛋白质，由一定数量壳粒聚合而成。
75细胞病变效应：大多数病毒属溶细胞型感染，病毒在敏感细胞内增值会出现CPE。可表现为细胞内颗粒增多，聚集团缩或融合，有的可形成包涵体，最后出现细胞溶解脱落死亡等
76空斑形成实验：是检测标本中病毒数量的一种方法，将一定量适当稀释的待检病毒液接种于敏感的单层细胞中，经一定时间培养后，在细胞上方覆盖一层融化尚未凝固的琼脂后继续培养，可见单个病毒的增值使感染的单层细胞溶解脱落，形成肉眼可见的空斑，一个空斑是由一个病毒增殖所致，计数培养皿中的空斑即可计数细菌数量。
77Dane颗粒：大球形颗粒，是完整的感染性病毒颗粒，呈球形，直径42nm，具有双层衣壳，血液中检出Dane颗粒标志着肝内病毒复制活跃。
78HBsAg和抗-HBs：HBsAg是HBV感染后的第一个出现的血清学标志物，也是诊断的重要指标之一，阳性见于急慢性肝炎、或无症状的携带者。抗-HBs出现是HBsAg免疫疫苗成功的标志。
79HBeAg和抗-HBe：是一种可溶性抗原，是HBV复制及传染性强的指标
80HBcAg和抗-HBc:存在于病毒核心部分以及受染得肝细胞核内，是HBV存在和复制活跃的直接指标。
81HIV：人类免疫缺陷病毒，属于反转录病毒科的慢病毒属，是获得性免疫缺陷综合征的病原体。
82内基小体：病毒在易感动物或人的中枢神经细胞（主要是大脑海马回的椎体细胞）中增殖，形成胞质内嗜酸性包涵体，称为内基小体。具有诊断价值
83阮粒：prion，的名称来源于蛋白性感染颗粒，是引起传染性海绵状脑病的病原体，主要组成是蛋白酶抗性蛋白，能抵抗蛋白酶K的消化作用。
89神奈川现象：泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻琼脂上产生β溶血现象
专性厌氧菌: 是指在无氧的环境中才能生长繁殖的细菌。此类细菌缺乏完善的呼吸酶系统，只能进行无氧发酵，不但不能利用分子氧，而且游离氧对其还有毒性作用。如破伤风杆菌、肉毒杆菌、产生荚膜杆菌等。
生长因子:具有刺激细胞生长活性的细胞因子。一类通过与特异的、高亲和的细胞膜受体结合，调节细胞生长与其他细胞功能等多效应的多肽类物质。
H2S试验 :测定微生物自含硫氨基酸（sulfur-containing amino acid）或无机硫化物（inorganic sulfur compounds）等受质中产生硫化氢（hydrogen sulfide）的能力
转化:是某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型的细胞的DNA而使它的基因型和表型发生相应变化的现象
转导:由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中
医院感染 广义是指医院内各类人群所获得的感染，一般指病人在住院期间发生的其他感染。
噬菌体：是感染细菌、真菌、放线菌的一类病毒，因部分噬菌体能引起宿主细胞裂解故称为噬菌体。
血浆凝固酶是能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病株大多数能产生,是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标.
败血症病原菌侵入血流并不断生长繁殖产生毒性代谢产物，出现全身中毒症状。
药物敏感试验 指在了解病原微生物对各种抗生素的敏感（或耐受）程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。
菌群失调：宿主某部位正常菌群中各种细菌间的比例发生大幅度的改变.
.菌落单个细菌在平板培养基上形成单一的肉眼可见的细菌集团，称为菌落。
.培养基 培养基是人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
包涵体某些病毒感染细胞后，在普通光学显微镜下，可见在胞质或胞核内出现嗜酸或嗜碱性染色，大小和数量不同的圆形或不规则的团块结构。
正常菌群正常人体的体表及与外界相通的腔道中，都存在着不同种类和数量的微生物。在正常情况下，这些微生物对人类无害，成为正常菌群。
内毒素指许多Gˉ菌的细胞壁结构成分，只有当细菌死亡破裂，菌体自溶，或用人工方法裂解细菌时才释放出来。
干扰现象：当两种病毒同时或先后感染同一机体或细胞时，可发生一种病毒抑制另一种 病毒增殖的现象。
菌血症 病原菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只是暂时或一过性通过。
菌丝：真菌的孢子以出芽的方式增殖，在适宜环境下孢子长出牙管，并逐渐延长呈丝状。
来源：中华检验医学网 （原文网址见本文“阅读原文”）
(3) [外斐试验]立克体、立克次体百科
立克次体病
目录
概念
病因
类型
临床表现
诊断依据
治疗原则
预防及预后
编辑本段概念
立克次体疾病(rickettsiosis)乃立克次体目中某些致病微生物所引起的多种急性感染的统称，呈世界性或地方性流行，临床表现轻重不一。传播媒介主要为节肢动物如蜱、虱、蚤、螨等，也可因家畜如猫、犬等抓、咬而发生。
编辑本段病因
近年来，随着立克次体分子生物学(16sr RNA序列、DNA-DNA杂交、全DNA或基因片段、质粒等)研究的进展，旧的立克次体分类已不能完全反映立克次目中所有种属的全貌，应运而生的是根据遗传物质对立克次体进行新的分类。16sr RNA序列的分析显示，立克次体可分为两个亚群，α亚群包括立克次体(Rickettsia)、埃立克体(Ehrlichia)、埃菲比体(Afibia)、考德里体(Cowdria)和巴通体(Bartonella)；γ亚群包括柯克斯体(Coxiella)和沃巴哈体(Wolbachia)。现并已发现很多新的种属如日本立克次体(Rickettsiajaponica)、查菲埃立克体(Ehrlichia Chaffeensis)、腺热埃立克次体(Ehrlicha Sennetsu)、汉赛巴通体(Bartonella henselae)等。罗卡利马体(Rochalimaea)的名称已为巴通体所取代，故战壕热的病原体也应改称为五日热巴通体(Bartonella quintana)。[1]
1.传染源：主要为小哺乳动物（啮齿类）和家畜，而人则是流行性斑疹伤寒和战壕热的唯一或主要传染源。 2.传播途径：传播媒介极大多数为节肢动物如蜱、虱、蚤、螨等。各种立克次体以共生形式存在于节肢动物体内，立氏立克次体、恙虫病立克次体、小蛛立克次体等并可经卵传代。蜱、螨、虱、蚤等的粪便中均含有病原体，而随粪排出体外；此外蜱和螨体内的立克次体尚可进入唾液腺和生殖道中。各种立克次体主要经节肢动物叮咬从皮肤进入人体，而贝纳柯克斯体主要从呼吸道进入体内而使人受染。
3.易感者：人群普遍易感，不同立克次体病的好发人群有较大差别。
人感染后可获相当稳固免疫力，在立克次体各组内（旧分类）尚存在交叉免疫现象。某些患者临床痊愈后，病原体可依然潜伏体内待机而动，当体内免疫力相对减弱时即可导致复发，但一般于停药后1～2周内发生，可能与应用氯霉素、四环素类等时间过早、疗程过短等因素有关。患流行性斑疹伤寒后数月至数年可在无再感染的情况下复发（称复发型斑疹伤寒），乃一特殊例子。
流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、Q热等呈世界性分布，而很多以蜱为媒介的斑点热组则呈地方性流行。国内较常见的立克次体病有流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病、Q热、北亚蜱传立克次体病等。
编辑本段类型
1．普氏立克次氏体，是流行性斑疹伤寒和斑疹伤寒的病原体。它为短杆状，0.8微米～2微米×0.3微米～0.6微米，也可长达4微米，单个存在或呈短链状。当人受到感染后，经10天～14天的潜伏期，骤然发病，有剧烈头痛、周身痛和高热，4天～7天后出现皮疹，严重的为出血性皮疹。有的还伴有神经系统、心血管系统等症状和其他实质器官损害。流行性斑疹伤寒，在人口密集和昆虫繁盛的环境内比较严重。当流行时，病人平均死亡率20%，严重时可达70%。病原体借人虱在人群中传染，所以灭虱是预防流行性斑疹伤寒的重要措施。
2．莫氏立克次氏体，是地方性斑疹伤寒（也称鼠型斑疹伤寒）的病原体。它的传播方式与普氏立克次体不同。它的自然宿主是家鼠，主要由鼠虱在鼠群中传播，如果鼠死亡了，鼠虱才离开鼠，转而叮吸人血，而使人受传染。
3．立克次氏立克次氏体，是落基山斑疹伤寒的病原体。最初发现于美国的落基山地区的蒙培拉州的山谷。疾病流行时，病人的死亡率高达90%。立克次氏立克次体在自然界中寄生于蜱和蜱所寄居的动物体内，人受蜱叮咬就会染病。
4．恙虫病立克次氏体，是恙虫病（丛林斑疹伤寒）的病原体。本病首先在日本发现，目前，我国东南沿海地区和台湾省也有病例报告。在日本，病人的死亡率约有60%。这种病原体由恙螨叮咬侵入人体，随血液扩散至血管内皮细胞中生长，发病。贮藏病原体的动物为野生啮齿动物并借螨传播。得了恙虫病，先是被叮咬处出现溃疡，周围有红晕，溃疡上盖有黑色焦痂，此外，还有皮疹，并造成神经系统、循环系统以及肝、肺、脾等损害症状。
编辑本段临床表现
多数立克次体病临床上可表现为发热、头痛和皮疹三联征，多发于春季和夏季，常有蜱咬、近期野营或职业性暴露病史。
1.落矶山斑点热：由立氏立克次体引起，经蜱叮咬而传播，曾流行于美国广大地区，以落矶山地区为多，其他尚有加拿大西部、南美等地区。潜伏期平均为7～8（3～12）天，临床表现轻重悬殊。大多起病突然，伴寒战、高热、剧烈头痛和关节疼痛，明显毒血症表现，也可有表情淡漠、烦躁谵妄、昏迷、偏瘫等中枢神经系统症状。皮疹大多出现于病程第3～5天，很快形成瘀斑。病情严重者应用抗生素后仍有较高的病死率，死因为心、肾功能不全和休克等。外斐试验可与流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒和恙虫病等区别。氯霉素和四环素等对一般病例有效，严重患者可加用激素。疫苗接种、个人保护等为重要预防措施。
2.北亚蜱媒立克次体病：由西伯利亚立克次体所致的急性传染病，主要发生于西伯利亚和蒙古，我国新疆、内蒙古和黑龙江等地也有病例和血清学阳性的报告。潜伏期3～6天，起病急，有发热、头痛、全身疼痛、眼结膜和咽部充血、相对缓脉等。蜱叮咬处有小焦痂，局部淋巴结肿大。皮疹分布于躯干和四肢，于病程第4～5天出现，呈红色多形性斑丘疹，间呈出血性。预后大多良好，无复发。四环素和多西环素对本病有效，外斐试验OX19与OX2阳性，OXk阴性，有助于与恙虫病相区别。
3.南欧热（包括马塞热、非洲热等蜱传斑点热）：是一种由蜱传播、康氏立克次体所致的发热性疾病。潜伏期5～7天。起病急骤，有高热、寒战、四肢及脊椎疼痛。头痛剧烈，多位于额部及眼后眶。热程8～14天。于病程第3～4天出现散布于全身的红色斑丘疹，重症者形成瘀点或瘀斑。蜱叮咬处可有小溃疡或焦痂，伴局部淋巴结肿痛。外斐试验OX2和OX19均呈阳性，OXK阴性。确诊有赖于补结试验等和（或）病原分离。可用四环素或氯霉素治疗，预后良好。
4.澳洲斑点热：为澳大利亚立克次体所致的急性感染性疾病。潜伏期7～10天，有发热和头痛，热程平均1周。蜱叮咬处有与恙虫病相似的焦痂，附近淋巴结肿大，伴疼痛、触痛。病程3～4天于躯干及四肢出现红色斑丘疹。病情一般较轻，预后良好。外斐试验OX2阳性、OX19弱阳性，OXk阴性，可与恙虫病相鉴别。也可从患者血中用组织培养或豚鼠接种分离出病原体。四环素、氯霉素等有良效。
5.立克次体症：是小蛛立克次体引起感染性疾病，潜伏期9～12天，起病急骤，伴发热寒战、头痛、背及关节痛。热程约1周，病程第1～3天开始出现斑丘疹，疏散分布，数天后变成疱疹，继而干燥成黑痂，脱落时不留疤痕。发热前1周被螨叮咬处有焦痂，局部淋巴结常肿大，有触痛。根据皮疹为水痘样和阳性血清补结试验可做出诊断，必要时做病原体分离。外斐试验阴性或弱阳性。氯霉素和四环素治疗有效，预后良好。血清流行病学调查显示，我国内蒙草原地区也可能存在本病，小家鼠为主要传染源，螨是传播媒介。
6.苏联传染性肾病肾炎：为蜱媒介传播的巴甫洛夫斯基立克次体（Rickettsin pavlovskyi）所引起，以肾损害为主的急性传染病，6～8月间流行于前苏联某些地区。急性起病，发热38.5～40℃，有面部潮红、咽痛、结膜和巩膜充血，伴背痛乏力，恢复较慢。尿检查有蛋白，红、白细胞及管型。可用四环素、霉素及对症治疗。从病人血中和死亡病例的脑、脑垂体和肝脏等中可分离出病原体。
7.战壕热：又名五日热，由五日热巴通体（原称为五日热罗卡利马体）经虱传播的急性传染病。人为唯一传染源，春冬季发病较多。主要临床表现为周期性发热、严重肌肉疼痛。胫骨痛、眼球痛、复发倾向及持久的立克次体血症。少数病人可出现心内膜炎、多发性血管瘤、内脏紫癜等，早期偶可出现为期短暂的红色斑丘疹。无症状立克次体血症可持续数月，甚至1～2年或更长。外斐试验阴性。确诊有赖于血清免疫学如补结试验等，也可采用人工感染虱子法，以患者血液喂虱，而在虱肠道中可找到立克次体。需与伤寒、流行性斑疹伤寒、回归热等鉴别。治疗可用四环素或氯霉素，疗程宜较长（8～10天），预后一般良好。
8.埃立克体病：是1986年在美国阿肯色州发现的一种新的立克次体病，1991年从患者血液中分离出病原体，命名为查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeeusis）与犬埃立克体的生物学特性非常相似，血清学与犬埃立克体有很强的交叉反应，16srRNA基因序列与犬埃立克体序列关系密切，同源性达98.2%。病原体主要侵犯人巨噬细胞和单核细胞。此病流行于美国中、西部。一次调查发现我国云南军犬及人群中抗查菲埃立克体抗体阳性率可达5%～6%，提示我国可能也有埃立克体自然感染存在。本病临床表现类似于斑点热组立克次体病，有发热、头痛、皮疹等。诊断需依靠血清学和分子生物学检查。治疗同其他立克次体病。预后良好。
编辑本段诊断依据
用于立克次体病诊断的方法虽有多种，但最常用者仍为外斐试验。宜取双份或三份血清标本（初入院、第2周和恢复期）滴定效价在1:160以上者为阳性，有4倍以上增长者则更具诊断意义。次常用者为补结试验和微量凝集试验，其他如IFA、ELISA、固相放射免疫测定（SPRIA）、乳胶凝集试验、间接血凝试验、免疫电镜等也有助于诊断，但临床上应用较少或仅供研究、流行病学调查等之用。
病原体的分离可采用鸡胚培养、组织培养，或豚鼠、小鼠、大鼠等动物接种。战壕热的病原体可在以血琼脂为基础的培养基上生长，除战壕热病原体和其他巴通体之外，其他人类立克次体病病原体的初代分离均采用豚鼠或（和）小鼠接种。由于病人血中立克次体很少，接种和组织培养等方法往往失败，且易导致实验室传播，不宜推广。
早期有效的治疗可使抗体产生延迟1周左右，因而必须在发病后4～6周重复血清学检查1次。
编辑本段治疗原则
可见，不同的立克次体能引起不同的疾病。但由于它们有一些共同的特性，所以，治疗方法也有一些共性，如一般的输液，良好的护理、隔离等。用药上也有些相似，通常情况下，治疗立克次体病可使用广谱抗生素，有较高疗效。用氯霉素治疗恙虫病时，必须连续用药4周，否则容易复发。四环素药品也同样有效，同时还可以用来治疗斑疹伤寒等。
和其他疾病一样，立克次氏体病是可以预防的。预防这类疾病同其他昆虫传播的疾病一样，首先应对昆虫等中间或储存宿主加以控制和消灭，如灭鼠、灭虱。
氯霉素、四环素、多西环素（强力霉素）等对各种立克次体病均有相当疗效。可使发热和其他症状及早消退，病程明显缩短，病死率大幅度下降。目前缺少其他药物对本病疗效的大系列报道。由于这些抗生素仅能抑制立克次体的繁殖，而不能将其全部杀灭，因而某些立克次体病用药后的复发可见增多，但不同株间可有明显差别。
对于确诊的危重病人，在疗程中可采用短期（3天左右）大剂量肾上腺皮质激素（简称激素）联合抗生素治疗。对于重症立克次体病病人，支持疗法也很重要。
编辑本段预防及预后
预防接种大多采用灭活疫苗，有鸡胚疫苗、虱肠疫苗、鼠肺疫苗、幼虱疫苗等，对斑疹伤寒组疾病均有一定成效；可减轻病情、缩短病程，降低病死率和控制当时的流行。Q热灭活疫苗和斑点热灭活疫苗接种也可取得较好效果，后者且对组间各疾病具有交叉保护作用。恙虫病立克次体由于存在抗原类型多、抗原性弱、难以提纯等问题，因此疫苗接种尚未获得满意效果。
参考资料
1． 病因资料来源 ．
开放分类：
疾病，医学
立克体病
立克体病（rickettsiosis）是由一组立克次体引起的自然疫源性传染病。人类立克次体病可分为5大组：
①斑疹伤寒组（含流行性斑疹伤寒和地方性斑疹伤寒）；
②斑点热组（含斑点热、马赛热、澳洲蜱型斑疹伤寒、立克体体痘症）；
③恙虫热组（含恙虫病）；
④Q热组（含Q热）；
⑤阵发性立克次体病组（含战壕热）。在我国已经发现的有流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫热和Q热。
立克次体是介于细菌与病毒之间的微生物，具有以下特点：
①需在活细胞内生长，在代谢衰退的细胞内生长旺盛；
②具典型的细胞壁、有DNA和RNA，呈短小、多形性球杆状，染色后光学显微镜可以查见。
③除Q热、战壕热及立克次体痘症的立克次体外，均与某些变形杆菌（OX19、OX2、OXK株）有共同抗原，故可进行外斐反应（变形杆菌凝集反应）以协助诊断。
④对广谱抗生素，如四环素族、氯霉素等敏感。
⑤其毒素属内毒素性质，为其主要致病物质。⑥耐低温、干燥，对热和一般消毒剂敏感。
立克次体病的共同特点是：
①病原体在自然界中主要在啮齿类动物（鼠类）和家畜（牛、羊、犬）等贮存宿主内繁殖。虱、蚤、蜱、螨等吸血节肢动物为主要传播媒介。
②特异的病理改变为广泛的血管周围炎和血栓性血管炎。
③主要临床特点是发热、头痛和皮疹（Q热除外），呈急性表现。
④广谱抗生素有效。病后可获持久免疫力，各病之间有交叉免疫力。
我国的立克次体病主要有流行性斑疹伤寒、鼠型斑疹伤寒、恙虫病和Q热。
